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脱水
①以上各级乙醇脱水时间可根据组织块的大小适当调整。对于小的组织块(如胃黏膜、支气管粘膜等)可适当减少脱水时间,对于较大的组织块可适当增加脱水时间,活体组织切片,但各级乙醇较长不要**过12h,无水乙醇不要**过4h。如中途因故不能继续进行下去,则可将标本退回至80%乙醇中保存。另外,脂肪组织和疏松结缔组织一般应延长脱水时间,在95%乙醇中水分必须脱净,脂肪必须溶解掉(50%以上浓度的乙醇可溶解脂肪和类脂质)。否则,石蜡不能渗入脂肪细胞和纤维组织,组织切片图片,无法切出好的切片,而且染色时也易脱片。
②若组织含水分过多(如胚胎组织),则脱水剂浓度应由更低级乙醇(如30-40%乙醇)开始,这对保证制片质量十分重要。
③若脱水不尽,切片后蜡块切面组织常出现凹陷(因蜡块中包埋的组织与空气接触后即干燥收缩)。这样的蜡块,虽能勉强切出切片,但染色效果较差,染色时组织也容易脱落。因此,脱水必须彻底,脱水彻底与否是制片质量好坏的一个重要环节。
④脱水剂的容积应为组织块总体积的5-10倍,脱水剂应及时过滤,更换。
切片组织切片法很多种,石蜡切片是病理诊断较常用的切片制作方法,称为常规石蜡切片法,即将经石蜡包埋后制成的组织是蜡块,组织切片,用切片机制成切片的过程。切片的厚度一般在3-5um,特殊情况,可切1-2um,具体步骤如下:
①将已修好、固定于支持器上(一般为木制品,习惯成为“木托”),并经冷却的组织块,安置在切片机的机头处。将切片刀装在刀架上,调整刀刃与蜡块至合适位置,使刀刃与蜡块呈5o-10o夹角。
②仔细移动刀架或蜡块支持器,使蜡块与刀刃接触,旋紧刀座和蜡块支持器。
③使蜡块的厚度为15-20um,用右手迅速旋转切片机轮,修切组织块表面,直到全部暴露组织块切片为止。但小标本不要修的太多,以免将有诊断价值的病变修掉。