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**临界流体是在**临界压力和临界温度时的一种物质状态，它既不是气体也不是液体，但兼有气体和液体的某些性质（色谱分析 主编丁黎 人民卫生出版社2008年7月版）。

液相色谱法（HPLC）是继气相色谱之后，70年代初期发展起来的一种以液体做流动相的新色谱技术。

液相色谱是在气相色谱和经典色谱的基础上发展起来的。

液相色谱仪的构造图3 液相色谱结构示意图液相色谱系统主要由流动相储液瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录仪组成，其整体组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。液相色谱的输液泵要求输液量恒定平稳，进样系统要求进样便利、切换严密。同时，由于液体流动相黏度远远**气体，为了减低柱压，液相色谱的色谱柱一般比较粗，长度也远小于气相色谱柱。图3所示为液相色谱仪的结构示意图。


溶质在反相介质上的分配系数取决于溶质的疏水性，一般疏水性越大，分配系数越大。当固定相一定时，可以通过调节流动相的组成调整溶质的分配系数。RPC主要应用于相对分子质量低于5000，特别是1000以下的非极性小分子物质的分析和纯化，Waters I-class液相供应商，也可以用于蛋白质等生物大分子的分析和纯化。由于反相介质表面为强烈疏水性，并且流动相为低极性的，生物活性大分子在RPC分离过程中*变性失活，所以，以回收生物活性蛋白质为目的时，应注意选用适宜的反相介质。


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