ECL化学发光试剂盒

本产品ECL化学发光试剂盒是一种高灵敏度的化学发光试剂盒，基本原理是以luminol为基础的ECL化学发光。本产品能与二抗上偶联的辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）发生化学反应，产生荧光，通过用X光片压片或其它适当荧光成像设备（CCD相机等）检测样品。

本公司目前生产的ECL化学发光试剂盒有两种，分别是G2014 ECL化学发光试剂盒和G2020 **敏ECL化学发光试剂盒。对于丰度较高的目的蛋白检测，例如内参蛋白等，推荐使用G2014，可检测含量大于等于2 ng的目的蛋白。而对于低丰度较难检测的目的蛋白，推荐使用G2020，该产品灵敏度较G2014提高至少5倍，可检测到pg级含量的蛋白，且发光更稳定。

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；4℃避光保存，有效期12个月。如果长期不用，可以-20℃保存更长时间。

组成

操作步骤

1. 配制ECL工作液：将ECL A液和ECL B液等体积混合，注意4℃避光保存。现配现用，2天内使用。

2. Western实验中PVDF膜经二抗孵育后，多次洗涤，滤纸吸去多余液体。在曝光匣上贴两层PE手套或者其他透明薄膜，将PVDF膜的蛋白面朝上放在曝光匣两层薄膜之间，加入混合好的ECL工作溶液覆盖在膜上放置1-2 min。

3. 用滤纸或吸水纸吸去ECL工作液，盖上层薄膜开始压胶片。

4. 压完的胶片用显影、定影试剂（推荐G2019，G2023，G2024）进行显影和定影。根据发光强度调整曝光条件。

注意事项

1. ECL A液和B液在吸取过程中必须要更换吸头，A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效，另外金属离子的污染会降低本试剂的灵敏度，请注意用干净吸头。使用后密封保存。

2. 如果曝光后背景很深，可能原因有二抗浓度过高，或一抗浓度过高，或者封闭液不合适，换用其他封闭液。

3. 如果荧光迅速淬灭，可能原因是目的条带荧光过强，导致HRP迅速消耗ECL。

4. 如果没有发光信号，可能是目的蛋白表达很弱，可延长压片时间。

5. 操作时请穿实验服，佩戴一次性手套

本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！