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浅析影响胎牛血清质量的几大因素

浅析影响胎牛血清质量的几大因素

 一、外观;拿到,接触的是外观,对于缺少细胞培养经验的人来说,外观的判断尤为重要

1、颜色

根据血红蛋白含量的不同,胎牛可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用标准是不20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高低对并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出过程的严谨规范程度,良好的操作能降低的溶血。

国产的点很分散,大多是由屠户后马上离心收集,所以很少会有溶血,表现出明亮的蜡,当然,国产也很少有标准意义上的胎牛。

进口胎牛或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛凝血功能差,红细胞破裂。

总的来说,国产的呈现出蜡黄。进口的,质量的呈现出谈黄、微红色,如Gibco 16000,差点的呈现出橘红色或鲜红色。当然,热灭活或保存不当的,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。

2、沉淀

很多客户,会发现进口有沉淀,从而怀疑的质量问题,这是没有根据的。

中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。

国产的,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从、冷冻、运输到生产会经过多次冻融,每次冻融过程,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,成品过滤后看起来反而加的“干净”,很少有沉淀产生。

进口的胎牛,过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀。当然,进口的新生牛,一般牛龄都在2周左右,中的各种蛋白含量明显偏高,生产后可能会浑浊,甚至有大量沉淀。

当然,购买回来的都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程在温度较低的状态下慢慢进行,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。

3、澄清度

进口胎牛由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡,而国产,因为绝大多数是新生牛,相对而言加粘稠,颜色略深,这对于初步接触的人很难判断,但把两者进行对比,可分辨。

二、主要技术指标

目前国内的质量标准是2005版的《人民共和国药典》,主要指标有以下几点:

1、内毒素

标准为不5EU/ml。内毒素是细菌破碎后细胞壁的成分,因此内毒素含量的高低可表现出到生产一系列过程中的无菌操作情况。目前,国产基本都能达到这一要求,很多进口胎牛内毒素含量反而高,如Gibco 26140,只要求不50EU/ml,高出我准10倍,即使是16000,也要10EU/ml,质量也未见影响。可见,内毒素含量偏高不影响质量,除非含量高,预示着已经污染。

2、总蛋白含量

胎牛一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明的牛龄偏大,不是胎牛,数值偏低,表明可能掺水了。

3、血红蛋白

标准为不20mg/dl,颜色越红,数值越高,反之,数值越低。

 

4、pH

国产,大多7.5,进口胎牛,大多7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别的来源。

5、微生物

包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原毒等。随着国内厂家生产条件的改善提高,细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能**控制,支原体经过0.1um过滤,大多也能。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的,主要是生产环境过程中带入,又无法过滤,很难,但对质量影响不大。病原毒,特别是BVDV,在国产中几乎以上都存在,这类微生物是影响国产质量的重要因素之一,而进口胎牛中基本都控制的很好。

6、球蛋白

国产的只是定性检测,结果也很不准确,进口胎牛大多定量检测。球蛋白的数值能体现出的时的牛龄情况,国产,基本都是新生牛的,中产生IgM,IgG的含量也偏高,进口胎牛,不含IgM,IgG的含量也较低。

7、其它

不管是国产还是进口,都是不测的(无四环素胎牛除外)。国外,的使用很严格,用量也很少,每头奶牛的产品包括都可以溯源的,因此可以做到胎牛中不含或含量低;国内,的滥用已成了普遍现象,中残留很高,对细胞培养为不利,这是国产质量差的根本原因。

三、血源

市场上的血源主要分为中国、北美、南美和澳洲。

1、国产质量差,这是公认的,主要原因并不是生产厂家的责任,而是环境差和的大量使用。国内环境污染严重,同时饲养过程中其滥用,有毒有害物质会大量残留在中,终不利于细胞的生长。

2、南美,来源很多,如Bioind的巴拿马、Gibco的乌拉圭、巴西等,这些由于的不可控性,质量参差不齐,当然,相对于国内来说好的多。另外,国内销售的南美大多颜色鲜红,如Bioind、Gibco、Hylone等,但阿根廷的例外,这可能和各国的、生产工艺有关。

3、北美,主要来自美国和加拿大,如Hclone的SH30396、SH30070、SH30071、Gibco的16000-044、26140-079等。这类,等级越高的颜色越淡,表现为淡黄中带一点微红,SH30070和SH30396对比就很明显,胎牛基本就能进行干细胞培养。北美还有一个显著特点就是每瓶都能溯源,这对一些大型的疫苗厂、药厂尤为重要。

4、澳洲,来源主要是新西兰和澳大利亚,这是在北美禁运之后进入中国市场的,一般不具有溯源功能,由于生产、运输等原因,价格相对来说比较贵。


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