实验原理:
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入微生物化的目标抗体,将未结合的生物素抗体洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
实验所需自备试验器材:
1. 酶标仪(450nm)
2. 加样器及头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
技术小提示:
1. 当混合或重溶蛋白溶液时,尽量避免起沫。
2. 为了避免交叉感染,配置不同浓度标准品、上样、加不同试剂都需要换头。另外不同试剂请分别使用不同的移液槽。
3. 每次孵育时,请正确使用封板胶可保证结果的准确性。
4. 混合后的显色底物在上板前应为无色,请避光保存;如微孔板后,将由物色变成不同深度的蓝色。
5. 终止液上板顺序应同显色底物上板顺序一致;加入终止液后,孔内颜色由蓝变黄;若孔内有,则表明孔内液体未混匀;请充分混合。
产品有效期:6个月
上海杰普斯生物科技有限公司专注于ELISA试剂盒,生化检测试剂等