病毒检测为什么大部分是检测核酸
基于核酸的检测,本质上是直接采集病毒本体,通过RT-PCR的方式直接检测病毒的基因组。只需要知道病毒的基因序列,就可以很快的设计出探针。全国可非常非常多(,给科研单位供货的,一般不生产医用)。检测时用的其他的试剂,都是通用的,生产也非常方便,国内存货非常多,但是为了使用方便还是会在试剂盒里面配套(其实不配套问题也不大,试剂很好找)。因此基于核酸的病毒检剂盒可以在病毒基因组测序完成(甚至部分完成)的数小时内完成设计,然后在一天内启动大规模生产,而且检测精度非常高。
核酸检测的步骤如下:
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采集样本(咽拭子,鼻拭子):如果病毒藏在下呼吸道,很有可能采集不到。分离核酸,提取total RNA(不难,但是需要有经验的人操作,新手容易出问题,而且临床上提取RNA的操作很少,很多检验人员不会)。使用Trizol法操作时间大约3.5小时,使用吸附柱法1.5-2小时可以完成。使用试剂盒和qPCR仪对病毒RNA进行逆转录和RT-PCR,可以直接输出结果,时间大约1.5小时。
一般第3步,是不会出现假阳性或者假阴性,RT-PCR的技术已经非常成熟,而且在检测时一般会做三个重复。检测过程中出现的假性结果一般出现在第一步和第二步,也就是没有成功采样,或者分离核酸失败。
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