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真菌毒素黄曲霉素荧光定量检测步骤

真菌毒素黄曲霉素荧光定量检测步骤

黄曲霉素检测所需仪器

天平、离心机、涡旋振荡器、恒温孵育器、荧光读数仪、微量移液器、两毫升离心管、黄曲霉毒素荧光定量检测卡、配套的移液器洗头、试管架、量筒等

黄曲霉毒素提取液配置


用量筒量取无水乙醇和蒸馏水按照1:1的体积比进行配置。
首先用250ml毫升量筒量取200ml无水乙醇导入配置50%乙醇水的瓶子里
在量取200ml毫升蒸馏水倒入50%乙醇水容器中,摇匀即可。
注:单独量取无水乙醇和蒸馏水,不能定容的方式来配置。

黄曲霉毒素试剂盒组成

说明书及IC卡、稀释液和5桶黄曲霉菌毒素荧光定量检测试纸条

黄曲霉毒素检测前准备

样本前处理,取≥1千克代表性样本,进行粉碎过20目筛混合均匀
孵育器需要提前10-15分钟开机预热。

黄曲霉毒素样本提取


称取粉碎好的样品5g倒入50ml离心管中
注意:称量允许误差是±1%,即4.95-5.05g之间。
用50ml量筒量取40ml50%乙醇水到50ml离心管中。
3000转/分 涡旋振荡器震荡提取5分钟
注:要求混匀充分,否则提取效率低,可能造成检测结果不准确
样品量比较多的话,可以手摇颠倒混匀10分钟来提取。或者220转/分钟摇床上震荡提取10分钟。
提取完后室温静置3分钟。

黄曲霉毒素样本稀释


静置过程中可以提前把2ml离心管做好标记准备好。
把1000ul移液器调整到450ul,移取450ul稀释液到2ml离心管中。
然后把200ul移液器调至50ul。
移取50ul静置好的上清液到2ml离心管中
盖好盖子涡旋震荡或手摇10秒。
将混匀后的离心管对称的放入离心机中,4000转离心5分钟或7000转离心1分钟即可。
离心完把离心管取出放到试管架上待用。

黄曲霉毒素样本的孵育及反应


把卡托从孵育器中取出,把所需检测的卡条装入,装卡条时注意对应通道位置,如图所示,通道1是黄曲霉。通道2是呕吐毒素,通道3是玉米赤霉烯酮。装好后把卡托放入到孵育器卡槽内,把孵育器上盖翻开,把对应项目的微孔放入到底托,调移液器到200ul,用200ul移液器把离心后的上清液加入微孔中,加完液体盖上黑色盖子孵育5分钟,把排枪调到100ul待用,计时结束后把移液器装好吸头放入到微孔中反复吹打混匀30-40次。(注:吹打时需参照视频所示操作,避免产生大量气泡)吹打混匀完后盖上黑色盖子孵育3分钟,3分钟后把孵育器合实,孵育5分钟(精确计时),

黄曲霉毒素样本读数


打开读数仪左侧电源键直到仪器弹出登陆界面,初始账号及密码:admin用触控笔录入登陆界面,把试剂盒里面的IC卡取出来分别扫描录入到仪器中,(注:IC卡上的批号必须和所用试剂盒的批号一致,不同批次的不能混用)。IC卡扫描完毕后点击*二个图标进行读数界面设置,把读数界面左下角的通道1-3对应卡条选择好项目,A/B选项的位置全部选择B。五分钟计时结束后把所有反应中的卡托全部取出,放入到仪器右下角的仓内,放置好后点读值即可,(注:有颜色的部分朝上,卡托放入位置如视频所示要在1分钟之内读数,**过1分钟检测结果无效),该界面为读数完毕后的数据呈现可在此处打印数据,此为打印出来的数据展示


天津龙科新域生物技术有限公司专注于呕吐毒素检测试剂盒,黄曲霉毒素检测试剂盒,玉米赤霉烯酮检测,真菌毒素检测,霉菌毒素检测大豆抗营养因子,大豆抗原检测,霉菌毒素检测仪等

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