现市场上常见的病毒样本保存液的设计或针对于核酸的保护,会指向病毒功能蛋白的保护。例如针对核酸的样本保存液中,通常含有dnase/rnase和其他功能酶的抑制作用,破坏功能蛋白,而主要保护功能蛋白的病毒样本保存液,对于核酸的保护效果又不佳。第一类病毒样本保存缓冲液更适用于pcr方法或其他分子检测方法的使用,而第二类病毒样本保存缓冲液更适用于病毒抗原或抗体的检测,比如elisa或胶体金、荧光等快速检测的使用。
目前病毒保存液的成分主要为Hank's液基础、庆大霉素、真菌抗生素、BSA(牛血清白蛋白*五组分)、生物缓冲剂TRIS、氨基酸、冷冻保护剂、甘油等多种组分。
1、Hank's液:是一种平衡盐溶液,主要用于细胞培养取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗。
2、庆大霉素、真菌抗生素:多种抗生素联合,具有抗细菌和抗真菌的作用。
3、BSA (V):牛血清白蛋白(BSA)作为蛋白质稳定剂,又称*五组分,是牛血清中的一种白蛋白,包含583个氨基酸残基,分子量为66.430kDa,等电点为4.7,牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用,可在病毒的蛋白质外壳形成一种保护膜,使其不易分解,保证病毒的完整性,提高分离率;还可在western blot中作为Blocking agent;在酶切反应缓冲液中加入BSA,通过提高溶液中蛋白质的浓度,对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附,能减轻有些酶的变性,能减轻有些不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性。
4、生物缓冲剂TRIS:TRIS(三羟)缓冲液构建的中性环境,有助于增加病毒的生存时间和感染稳定性。
5、氨基酸:为病毒存活提供必需的营养物质。
6、冷冻保护剂:通常病毒保存液需要-70℃的低温保存,冷冻保护剂可以更好的保护病毒完整性,加入冷冻保护剂可保护细胞免受溶液损伤和冰晶损伤。冷冻保护剂同溶液中的水分子结合,发生水合作用,弱化水的结晶过程使溶液的粘性增加从而减少冰晶的形成,同时冷冻保护剂可以通过在细胞内外维持一定的摩尔浓度,降低细胞内外未结冰溶液中电解质的浓度,使细胞免受溶质的损伤。
7.甘油:即丙三醇,甘油具有营养剂、干燥剂的作用。50%浓度的甘油使保存物处于相对静止状态。病毒对外界的抵抗力不强,对温度敏感。
德晟是一家体外诊断试剂、采血管添加剂、生物缓冲剂、化学发光试剂研发生产和销售为一体的高新科技企业,生产的病毒保存液有灭活型和非灭活型,已为多家客户提供产品,并得到客户反映度很好,市场上报道出多个非灭活型病毒保存液出现长菌现象,但德晟在多次研究试验下解决了这个问题。
湖北新德晟材料科技有限公司专注于血清分离胶,肝素,肝素,EDTA二,EDTA三,促凝,TOOS,TOPS,ADOS,ADPS,ALPS,DAOS,Tris,Tris-HCL,Bicine,Caps,Mops等