在许多生物实验中需要用缓冲液来维持有效的PH值,缓冲液对实验的成败至关重要。选择缓冲液时首先要考虑实验中的PH值与缓冲液PH值范围一致,在考虑不同缓冲液的优点和缺点是否适合你的实验。生物缓冲液种类很多,在本文中我们主要讨论比较常用的几种生物缓冲液的制备方法。
1、制备TRIS碱和TRIS-HCL缓冲液
Tris:制备 1 升 1M Tris 缓冲液,先准备将121.14克Tris粉末溶解在750mL的dH20中,用浓调节至所需的 pH 值,用 dH2O 填充至 1L 的较终体积。
Tris HCl:要制备1升 1M Tris HCl 缓冲液,先将157.60g的Tris-HCl溶解在 750mL的 dH2O 中,用 10N调节至所需 pH,用 dH2O填充至1L的较终体积。
2、制备HEPES缓冲液
制备 1 升 1M HEPES 缓冲溶液,先将 238.3克HEPES粉末溶解在750 mL的dH2O 中,用10N 调节至所需 pH,用dH2O填充至 1L 的较终体积,并通过过滤器或高压灭菌器进行消毒。将缓冲液储存在 4°C。
3、制备PIPES缓冲液
制备1升 1M PIPES 游离酸缓冲溶液,先将302.37克PIPES游离酸加入600mL的dH2O,使用 10N 调节至所需 pH,用 dH2O填充至 1L 的较终体积。
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