为抵制外界少量强酸碱对生化研究工作的影响,我们常会用到一类重要试剂——缓冲溶液。Tris三(羟),CAS#77-86-1作为缓冲液家族中的重要成员,广泛用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备;医药中间体;用于表面活性剂、化促进剂的制备;制备含Tris结构单元的水溶性高分子作为涂料分散剂;室内甲醛吸附材料的制备等。
Tris缓冲液的优点也比较明显。因为Tris碱的碱性较强,所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液;其次tris对生物化学过程干扰很小,不与钙、离子及重金属离子发生沉淀。
配制Tris-HCl缓冲液的方法有两种:分别配制0.05 mol/L Tris和0.05 mol/L HCl溶液,然后按常用表中所列体积混合即可。但是由于标准浓度的稀不易配制,所以常用另一种方法:以配置1 L 0.1 mol/L的Tris-HCl缓冲液为例:先称12.11 g Tris碱溶于950 mL~970 mL 去离子水中,边搅拌边滴加4 N HCl,用pH计测定溶液pH值至所需的pH值,然后再加水补足到1 L。Tris缓冲液在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂,它的常用有效pH范围是在“中性”范围,如:
Tris-HCl缓冲液:pH=7.5~8.5
Tris-盐缓冲液:pH=5.0~9.0
在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系稳定pH值;在凝胶中使用Tris-HCl缓冲体系稳定pH值;被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂;Tris缓冲液的低离子强度特点还可用于线虫的中间纤维的形成;在Tris缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”,可用于DNA的稳定和存储;将调节pH值的酸溶液换成,获得“TAE缓冲液”,换成可获得TBE缓冲液。这两种缓冲液常用于核酸电泳实验中。
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