随着工业的迅速发展和人民生活水平的进步,人们对环境和自我健康日益注重,特别是SARS和禽流感后,人们愈加注重抗菌剂及抗菌产品的开发和研发。因为抗菌剂和抗菌产品的多样性,很难用统一的办法来点评其实在的抗菌作用。了解国内世界抗菌产品和灭菌剂的检测办法,有助于企业正确和科学点评产品抗菌功能,进步产品的竞争性。
术语
抑菌:防止或按捺微生物成长繁衍的作用;
灭菌:杀死微生物营养体和繁衍体的作用;
灭菌值(率):菌和样品触摸必定时刻前后活菌对数值之差或菌削减百分比。
抑菌值(率):菌和规范样品及已处理的抗菌样品触摸必定时刻后的活菌对数值之差,或菌削减百分比;
1. 抗菌剂的检测
1.1抗菌剂的分类
抗菌剂:指能够在必定时刻内,使某些微生物(细菌、真菌、酵母菌、藻类及病毒等)的成长或繁衍保持在必要水平以下的化学物质。
抗菌剂大致分为**抗菌剂和无机抗菌剂两大类:
无机抗菌剂以银、锌、铜等为主质料,以无机填料为载体,制成无机抗菌剂,耐高温功能好;有**抗菌剂以酯类、醇类、酚类为主要质料,耐高温性较低,一般在200℃以下,个别为300℃,灭菌时刻短,偶有析出等现象。
1.2抗菌剂的检测
抗菌剂的查验办法也是有很多种, 常见的点评办法为较小抑菌浓度(MIC)和较小灭菌浓度(MBC)
1.2.1试管法
长处:操作简单,对仪器没有太严格要求
缺陷:判别成果的人为因素大,不够精准,样品用量大;
在消毒技术规范里面有介绍。
将样品稀释成不同浓度,加入到无菌试管中,在每个试管中加入必定浓度的测验菌,培育必定时刻后肉眼调查培育液的混浊状况,如果是弄清的,阐明没有细菌的增加,即细菌的成长得到了按捺。然后将一切弄清管都分别划线在培育基外表,若无细菌成长,则阐明测验的菌现已被杀灭。以此来判别该样品的较小灭菌浓度和较小抑菌浓度。
样品A测验菌种金黄色葡萄球菌ATCC 6538Con.MIC6.25ppmC/C/C3.12ppmC/C/T1.56ppmT/T/T0.78ppmT/T/T样品A试管法MIC成果:3.12ppm
1.2.2 96孔板-酶标仪法
长处:机器判读成果,精准度高,样品量少;
缺陷:对试验室仪器要求较高;
能够依据不同的样品挑选不同的办法,针对比较宝贵的样品,或样品量少的状况,能够选用96孔板的办法,这个办法对样品的用量很少,终究的成果是用酶标仪来读取OD值,相对而言,比用肉眼调查弄清度来得更为精准。
将样品稀释到测验开始浓度后进行用多通道移液枪移取到96孔板中,然后对样品顺次进行对倍稀释,稀释完毕后加入测验进行培育,培育后上酶标仪读取OD值,未成长的浓度点即为该样品MIC值;将一切未成长的浓度梯度孔划线别离于固体培育基上并培育,无菌落成长的浓度即为该样品的MBC值。
96-孔板法
样品A (金黄色葡萄球菌ATCC 6538 )
(ppm)Blank6.253.121.560.78Growth ControlA0.0460.0480.0480.1660.2250.215B0.0470.0460.0480.1630.2420.218C0.0470.0460.0470.1660.2080.206D0.0460.0470.0460.1810.2270.211E0.0490.0470.0470.1730.2040.218F0.0460.0450.0460.1620.2180.205G0.0470.0450.0450.1680.2080.213H0.0470.0430.0440.1670.2180.208样品A 96孔板法MIC成果:3.12ppm
比较上述两种办法:
1) 96孔板法的样品用量仅为试管法的1/6。针对一些比较宝贵的样品可挑选96孔板的办法。
2) 96孔板一块板上可一起操作10个浓度,2个对照样,8个平行,仪器读数,成果的准确度相比较试管法大大进步。
3. 抗菌产品的检测
抗菌产品的检测一般分定性、定量和现场模仿等三种办法:
定性办法:对产品的抗菌功能进行定性的判别,相对较笼统,操作简单。
定量办法:对产品的抗菌功能进行定量的检测,给出产品的具体抑/灭菌参数,能更清楚地了解产品的抗菌功能,可表示为产品的灭菌率(%),灭菌活性值(对数削减值)等。
现场模仿试验法:模仿产品的实在运用状况来点评其抗菌的功能。
抗菌产品依据应用领域的不同大致能够分红几大类:纺织品、高分子塑料产品、日化卫生用品和消毒剂和涂料等。针对不同的产品类型世界和国内都有不少相应的检测办法,如:
3.1 纺织品:AATCC100; AATCC147; AATCC30; JIS L 1902; EN ISO 20645; EN ISO 20743; EN 14119; GB/T 20944.1.2; GB 15979; FZ/T 62015; FZ/T 73023等。
3.2高分子塑料产品、涂料:ISO22196; JIS Z 2801; ISO 846; ASTM G21; QB/T 2591等。
3.3日化卫生用品和消毒剂:EN1500;EN1276; EN 1040; GB 15981;GB/T 19877.3;消毒技术规范等。
3.4 涂料: USP; EP 5.1.3,做成涂片后也可参照塑料产品的检测办法进行点评。
办法的不同直接导致测验的成果及鉴定的规范也将不同。
4.抗菌产品的检测常见的点评办法主要有以下2种:
4.1灭菌值(率)
4.2抑菌值(率)
4.3模仿点评法
4.1.1灭菌率为抗菌产品触摸必定数量污染菌后,在确定的时刻内细菌削减百分比或细菌对数值削减级别。
在这个试验中,触摸时刻确实定是很重要的,不同的触摸时刻能够得到不同的试验成果。
触摸时刻可依据产品的用途来确定,例如消毒剂、洗手液,一般触摸的时刻仅为1-10分钟;抗菌纺织品,塑料制品建议的触摸时刻为18-24小时,许多资料无法供给细菌继续成长所需求的营养成分,污染菌在触摸24小时后,细菌会发生自然衰亡的状况,所以试验中触摸时刻一般不**过24小时。
4.2.1当细菌削减的数量不是和原始污染菌的浓度进行比较,而是和同原料没有抗菌处理的对照样品经过同样触摸时刻后残留的细菌数量进行比较时,反映的是产品的抑菌作用。抑菌值会随不同的测验对照品发生变化,对照品的挑选对正确点评抑菌值有很关键的作用。
4.3.1模仿法
模仿法试验是模仿产品的实践运用环境、办法、程序,对产品的抗菌作用进行点评。
此办法较为实践客观,特别是对3.1-3.4法不适用的产品所选者运用,例如气体状的灭菌产品,选用3.1-3.4的办法都无法对其进行点评,咱们能够选用模仿法,人为制造一个污染空间,对产品运用前后的细菌数量进行检测,点评产品的灭菌值(率)。
除此之外,对一些洗刷产品咱们也能够模仿人皮进行测验,模仿人皮咱们能够选用人造皮或动物皮代替,模仿咱们的皮肤经过这些产品洗刷或消毒的进程,计算产品运用前后细菌削减。
有一些试验还能够直接在受试者身上进行,例如EN 1500-1997《化学消毒剂和防腐剂 擦手剂 试验办法和要求》即选用的是真人的洗手进程,经过对一组12-15人洗手进程中,得到的灭菌率进行数学统计,较终得到产品的灭菌作用点评。
在咱们国家消毒技术规范[2008]消毒剂对手消毒模仿现场试验章节里有许多种,模仿法测验的介绍。企业能够依据自己对产品的需求进行挑选。
结论
抗菌剂和抗菌产品抗菌功能测验的办法具有多样性,各种办法各有其优缺陷。故在抗菌检测中须依据样品的各种特性来确定相应的检测办法,才能使得每个企业能对自己产品的抗菌/灭菌功能有正确
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